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细胞复苏注意事项

时间:2020-05-07 09:02来源:未知 编辑:美高梅官方网站 点击:
注意事项:液氮罐

1、注意无菌操作

2、细胞复苏时融化冻存细胞速度要快,防止细胞损伤,细胞复苏后的操作**在适宜温度中进行,减少冷冻保护剂对细胞的毒性。

3、为了避免复苏过程中细胞液中有冰晶的出现,破坏细胞膜及细胞内部结构。从液氮拿出来,要快速丢入37度水浴,等细胞液刚刚化完取出,加培养液稀释。

4、细胞放入水浴中注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动,使其受热均匀,并防止水浴时水进入细胞冻存管污染细胞。打开细胞冻存管之前要用酒精棉球将冻存管消毒并晾干。

5、液氮一定的危险性,打开液氮罐取出细胞时,要注意防冻,戴防冻手套,防护眼睛。

6、如果冻存管密封不严,液氮可被吸入。由于解冻时冻存管中的气温急剧上升,将可能发生爆炸。复苏过程中应盖上恒温水浴锅的盖。

细胞复苏后贴壁细胞较少的原因:

1、冻存细胞时消化时间过长,导致细胞复苏时失去铁壁能力。

2、细胞冻存液的质量不好也会导致细胞死亡。

3、冻存液的量加的太多也不好。液氮罐

4、冻存的时候把DMSO混均匀,会有一些影响,但不会太大。
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